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培养基牛肉浸膏 蛋白胨 蒸馏水培养基 牛肉浸膏

2020-08-17 18:34新闻中心 人已围观

简介培养基牛肉浸膏 蛋白胨 蒸馏水培养基 牛肉浸膏 蛋白胨 葡萄糖 蒸馏水 碳源基础培养基 大豆蛋白胨、硫酸铵 磷酸二氢钠 磷酸氢二钾 七水硫酸镁 无水氯化钙 蒸馏水 氮源基础培养基 葡...

  培养基牛肉浸膏 蛋白胨 蒸馏水培养基 牛肉浸膏 蛋白胨 葡萄糖 蒸馏水 碳源基础培养基 大豆蛋白胨、硫酸铵 磷酸二氢钠 磷酸氢二钾 七水硫酸镁 无水氯化钙 蒸馏水 氮源基础培养基 葡萄糖 磷酸二氢钾 磷酸氢二钠 七水硫酸 蒸馏水七水硫酸亚铁 氯化钙 以上培养基均是在高温高压 条件下灭菌 主要仪器和试

  培养基牛肉浸膏 蛋白胨 蒸馏水培养基 牛肉浸膏 蛋白胨 葡萄糖 蒸馏水 碳源基础培养基 大豆蛋白胨、硫酸铵 磷酸二氢钠 磷酸氢二钾 七水硫酸镁 无水氯化钙 蒸馏水 氮源基础培养基 葡萄糖 磷酸二氢钾 磷酸氢二钠 七水硫酸 蒸馏水七水硫酸亚铁 氯化钙 以上培养基均是在高温高压 条件下灭菌 主要仪器和试剂 主要仪器广西大掌硕士掌位论文巨大 磬菌曹株产抗菌物质的发酵条件优化墨 生产公司试剂名称 美国 公司 色谱级甲醇 色谱级乙腈 国药集团化学试剂有限公司 阿拉公司 色谱级乙酸铵 木瓜蛋白酶 捷瑞生物工程有限公司 胰蛋白酶 美国公司 蛋白酶 美国默克公司 胃蛋白酶 美国塔公司 软件 软件。 数据处理软件 巨大芽孢杆菌发酵条件的优化菌株种子液的制备 将保存于。的菌株转移至培养基平板上 取环接种至培养基中在摇床温度为、转速为 时培养 备用。菌株发酵滤液的活性测定 以水稻纹枯病菌作为指示菌 采用抑菌圈法 测定菌株发酵 滤液的活性。在培养皿中倒入 培养基 冷凝后 用灭菌打孔器孔径为 打孔 每孔加入此的发酵滤液 同时以加入等量培养液和清水处理为对 每个处理次重复置于 的恒温培养箱中培养 后采用十字交叉法测量抑 菌圈的直径测量结果减去孔径 取平均值。 培养基配方的优化 碳源 的量分别将蔗糖乳糖 葡萄糖 麦芽糖 一果糖和 半乳糖用细菌过 滤器 过滤后加到灭菌的碳源基础培养基中 制各成含不同碳源的培养基 以碳源基础培养基为对照。接种 菌株种子液至装液量为 振荡培养。参照的方法测定各处理发酵滤液对水稻 纹枯病菌 的抑菌的活性 每处理重复次。 氮源 的量分别将牛肉浸膏、酵母浸膏、蛋白胨、硝酸钾、硫酸铵和硝酸铵用细菌过滤器 过滤后加到灭菌的氮源基础培养基中 制备成含不同氮源的培养基 以氮源基础培养基为对照。接种 菌株种子液至装液量为 培养瓶中于。、振荡培养。参照 的方法测定各处理发酵滤液对水 稻纹枯病菌 的抑菌的活性 每处理重复次。 无机盐 以只含最佳碳源和氮源含量均为 的培养基为基础培养基 别加入氯化钠、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、氯化钙 、七水硫酸亚铁 、五水硫酸铜 、氯化锰、 硫酸锌和氯化钴到基础培养基中 制各成含不同无机盐的广西大掌硕士掌位论文巨大芽孢杆菌菌株产抗菌物质的戋醇条件优代 培养基将这些培养基也在 高温高压 础培养基为对照。接种菌株种子液至装液量为 培养瓶中 振荡培养。参照的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹枯病菌 的抑菌的活性 每处理重复次。 培养基配方正交优化 在筛选出最佳碳源、氮源和无机盐的基础上 选用蔗糖、蛋白胨、氯化钠和磷酸氢 二钾为试验因素 每因素个水平 不考虑相互作用 采用正交表设计 比较 菌株种子液至装液量为 各配方组合对菌株产拮抗物质的影响。接种 振荡培养。参照 的方法测定各处 理发酵滤液的对水稻纹枯病菌 的抑菌活性 每处理重复次。 发酵条件的优化 以测定各处理的发酵滤液的抑菌活性为指标 选用 筛选出的优化培养基 定培养温度培养基的起始值 培养时问 接种量和摇床转速等发酵条件对菌株产拮抗物质的影响。 培养温度对菌株产抗菌物质的影响 接种 菌株种子液到优化的培养基装液量为 培养瓶振荡 下同中 分别于。、。、。、。、。和。下 培养 。参照 的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹枯病菌足的抑菌活 每处理次重复。培养基起始值对菌株产抗菌物质的影响 将灭菌后培养基的起始值分别用 盐酸和 氢氧化钠调至 每瓶接种菌株种子液 振荡培养。参照 的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹枯病菌只。的抑菌活性 每处理次重复。 培养时问对菌株产抗菌物质的影响 接种 。参照的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹枯 荡培养、、、、、、和 病菌 的抑菌活性 每处理次重复。 接种量对菌株产抗菌物质的影响 分别以 振荡培养。参照 的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹桔病菌 巨大芽孢桐亩曹拳产舅茸物质的爱醇条件优化乃分离蓥冀翔究 的抑菌活性 每处理次重复。 装液量对菌株产抗菌物质的影响 装液量分别为、、、和 培养瓶每瓶接种 菌株种予液 振荡培养。参照 的方法测定各处理发酵滤液 对水稻纹枯病菌 的抑菌活性 每处理次重复。 摇床转速对菌株产抗菌物质的影响 接种 菌株种子液到至优化的培养基中 振荡培养摇床转速 分别为、、、和 。参照 的方法测定各处理发酵滤液对水稻 纹枯病菌 的抑菌活性 每处理次重复。 。发酵条件的正交优化 以培养温度、培养基的起始、培养时间、接种量和装液量等个因素为试验因 每因素个水平不考虑互作用 选用正交表设计交试验试验因素和水平 见表 接种 菌株种子液后至装液量为 比较各种发酵条件组合对菌株产拮抗物质的影响参照 的方法测定各处理发酵滤液对水稻纹枯病菌 的抑菌活性 每处理次重复。 菌株抑菌物质的分离纯化及鉴定 菌株的培养 菌株种子液接种至优化后的培养基中并在摇床温度为 、转速为 下振荡培养 备用。 拮抗物质抑菌活性的测定方法 采用菌丝生长速率法 将分离纯化获得的各馏分于 磷酸缓冲液 中溶解 各馏分与的培养基左右混匀 倒入 的培养 冷却后备用。用直径为的打孔器在水稻纹枯病菌菌落边缘切取菌饼 下恒温培养后测量菌落直径 并计算抑菌率 以磷酸缓冲液和清水处理为对照 每处理次重复袁高庆 拮抗物质的分离纯化拮抗物质的提取和制备 拮抗物质的提取参考叶云峰的方法 将菌株的发酵液在转速为 下离心 去除菌体 收集上清液 再用 的盐酸将上清液的调为 离心去除上清液 收集沉淀。合并 在下静置 收集所有的盐酸沉淀 加入适量的甲醇 抽提甲醇并于下用旋转蒸发仪进行减压浓缩 获得深黄色的膏状物 即为粗 提物。参照 的方法 将粗提物的最终浓度设为 测定粗提物对水稻纹枯 病菌 的抑制作用。 高效液相色谱法的分离纯化 液相条件的摸索 波长为采用等度洗脱 色谱柱 流动相溶解粗提物 岬滤膜备用。 选择流动相为乙腈 乙酸铵水溶液的比例 流速为样品浓度为 室温。比较不同流动相时基线的平稳状况和层析峰的峰形 选择最佳流动相比例。收集层析峰 利用离心浓缩机将样品浓 缩干之后测定其的活性 方法如 浓度为 。分析检验浓缩后的样 验证其纯度。制各柱制各样品 选择最佳洗 经过条件摸索后 制各条件为色谱柱 脱条件 流动相为乙腈 乙酸铵 波长为 流速为 浓度 鉴定纯拮抗物质双缩脲反应和茚三酮反应 参照叶云峰方法 双缩脲反应 取支试管 分别加入 纯拮抗物质溶液和 的磷酸缓冲液 然后加入 氢氧化钠溶液滴 再加入滴硫酸铜溶液 。观察纯拮抗物质溶液和溶液的颜色变化。茚酮反应 取支试管 分别加入 纯拮抗物质溶液和 的磷酸缓冲液 然后加入 茚三酮 乙醇溶液滴 在沸水中加热近个小时观察广西大掌硕士掌位论文宜芽孢嗣穿菌株产埘宵物质的裳翻条件俄化萌分离鉴定研究 纯拮抗物质溶液和溶液的颜色变化。 氨基酸组分分析 准确称取 盐酸 再将水解管放入冷 样品于水解管中 然后加入 冷冻再接到真空泵的抽气管上 抽真空接近 然后充入高纯度的

  巨大芽孢杆菌B196菌株产抗菌物质的发酵条件优化及分离鉴定研究可编辑,枯草芽孢杆菌,芽孢杆菌,地衣芽孢杆菌,蜡样芽孢杆菌,芽孢杆菌属,凝结芽孢杆菌活菌片,苏云金芽孢杆菌,凝结芽孢杆菌,坚强芽孢杆菌

Tags: 硫酸铵二钠 

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